Este art鱈culo recoge la��conferencia impartida por la Dra. Mar鱈a Pe単as, de Recombina Biotech, en el��XXXI Simposium Internacional de Biovet en Tarragona, durante la tercera sesi坦n dedicada a los pronutrientes, que tuvo lugar el d鱈a 28 de mayo de 2018. Bajo el t鱈tulo,�����Evaluaci坦n de la capacidad de Alquernat Magacal para incrementar la absorci坦n de calcio en enterocitos�����la conferencia desgran坦 la eficacia de este producto, basado en pronutrientes, que mejora la absorci坦n intestinal. El veterinario del equipo de Biovet S.A, Dr. Ant坦n Tallero, ha realizado la adaptaci坦n de la ponencia.

INTRODUCCI��N

Alquernat Magacal es un producto a base de pronutrientes, que son mol辿culas activas de origen bot叩nico que mejoran la calidad de la c叩scara y evitan la p辿rdida de hueso, al aumentar la absorci坦n de calcio a nivel intestinal.

As鱈 pues, Alquernat Magacal, ayuda a mantener niveles de calcio adecuados en gallinas ponedoras y reproductoras, en las que es com炭n que ocurran deficiencias dando lugar a defectos en la calidad del huevo y 坦seas, como el s鱈ndrome de fatiga de jaula y fractura de huesos como la cabeza del f辿mur. Para conseguir esto, Alquernat Magacal act炭a directamente en las c辿lulas de la mucosa intestinal (enterocitos) incrementando la absorci坦n intracelular de calcio.

Para demostrar su eficacia, se desarroll坦 un estudio in vitro en el laboratorio Recombina a finales de 2016, en el que se cuantifica la absorci坦n de calcio de los enterocitos tras la adici坦n de este producto dise単ado por Biovet S.A.

OBJETIVO

Evaluar el efecto de Alquernat Magacal sobre la absorci坦n de calcio midiendo la concentraci坦n de calcio intracelular en enterocitos.

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DISE��O DEL EXPERIMENTO

• Determinaci坦n de la absorci坦n de calcio

Para determinar la cantidad de calcio absorbido por los enterocitos se utiliz坦 FLUO-4, que es un indicador permeable de calcio que permite cuantificar la concentraci坦n de calcio citos坦lico por fluorescencia.

Cuando FLUO-4 atraviesa la membrana celular, es metabolizado por estearasas, generando Fluo-4/Ca2+, que no puede atravesar la membrana de nuevo.

La l鱈nea celular utilizada en el ensayo fue IPEC-J2, que es una l鱈nea no transformada, proviene de tejido intestinal de lech坦n y se utiliza en modelo para estudios con desaf鱈os.

Los enterocitos de cultivaron hasta obtener confluencia (2-3 d鱈as, 80-90% crecimiento celular) en placas especiales para evaluar la fluorescencia.

• Tratamientos celulares

Se establecieron 5 lotes o tratamientos: tres con diferentes concentraciones de Alquernat Magacal, un control negativo y un control positivo con carbacol, mol辿cula que incrementa la movilizaci坦n intracelular de calcio. Cada tratamiento se distribuy坦 en 12 pocillos: 6 con fosfato c叩lcico 2 mM y 6 con EGTA 1mM.

Grupo 4 y 5 se usan como grupos control. Se toma grupo 4 como control negativo, sin ning炭n tipo de tratamiento. Y al grupo control positivo se le a単ade carbacol, que es una sustancia que incrementa la movilizaci坦n intracelular de calcio.

• Tratamientos con Fluo-4

Tras la incubaci坦n con Alquernat Magacal, las c辿lulas se lavaron y se a単adi坦 Fluo-4.

Se incubaron los pocillos en un ambiente oscuro durante 1 hora y se determin坦 la fluorescencia, que indicar叩 la concentraci坦n de calcio absorbido por el enterocito.

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RESULTADOS

En la gr叩fica superior podemos observar los niveles de fluorescencia que se determinaron tras la incubaci坦n con Alquernat Magacal. Las barras de color azul indican nivel de fluorescencia por presencia de calcio absorbido en del medio. El color rosa EGTA expresa el nivel de calcio citos坦lico en las c辿lulas donde no se ha adicionado calcio al medio. Es decir, este representa el calcio basal.

Hay una relaci坦n entre la concentraci坦n de Alquernat Magacal y nivel de fluorescencia, o lo que es lo mismo, concentraci坦n de calcio citos坦lico.

En el lote o tratamiento 3, donde la concentraci坦n es mayor, se evidencia una mayor diferencia entre calcio absorbido del medio y calcio basal y por lo tanto una mayor capacidad de absorci坦n.

CONCLUSIONES DEL ENSAYO

Este ensayo indica que Alquernat Magacal incrementa la concentraci坦n intracelular de calcio mediante el incremento de la absorci坦n en enterocitos.

Se observa una mayor eficacia (incremento de absorci坦n de calcio significativa) utilizando una diluci坦n 1:100 de los principios activos.

Esto significa que Alquernat Magacal ayuda a obtener la cantidad adecuada de calcio, importante en m炭ltiples funciones, incluyendo la formaci坦n de la c叩scara y del hueso.